掃描電鏡如何進(jìn)行斷層成像?
日期:2025-02-08
掃描電鏡(SEM)通過斷層成像可以獲得樣品內(nèi)部的三維結(jié)構(gòu)信息。這種方法通常被稱為聚焦離子束掃描電鏡(FIB-SEM)斷層成像,或者是通過特定的軟件結(jié)合多視角圖像進(jìn)行重建。以下是常見的實(shí)現(xiàn)方式和操作步驟:
1. 基于 FIB-SEM 的斷層成像
原理:
FIB(聚焦離子束)用來(lái)去除樣品表層的微薄層。
SEM 在每次去除后掃描樣品的截面圖像。
多次重復(fù)操作,獲得一系列連續(xù)的二維圖像。
圖像經(jīng)過處理和重建,生成三維結(jié)構(gòu)。
具體步驟:
樣品制備:
將樣品安裝在樣品臺(tái)上,通常需要鍍導(dǎo)電層(如金或碳)以避免電荷積累。
根據(jù)研究目標(biāo),可能需要對(duì)樣品進(jìn)行切割或固定,以確保目標(biāo)區(qū)域能夠被離子束處理。
區(qū)域選擇:
使用 SEM 確定需要進(jìn)行斷層成像的樣品區(qū)域。
FIB 用來(lái)標(biāo)記切割區(qū)域,定義斷層成像的范圍。
FIB 去除表層:
利用聚焦離子束(通常為 Ga? 離子),逐層去除樣品的材料,去除厚度可以在納米量級(jí)精確控制(如 10 nm/層)。
SEM 圖像采集:
每去除一層后,用 SEM 獲取切面圖像。
需要調(diào)節(jié) SEM 的工作參數(shù)(如加速電壓、探測(cè)器類型)以優(yōu)化圖像質(zhì)量。
圖像處理:
收集到的所有二維圖像通過去噪、對(duì)齊、配準(zhǔn)等處理。
使用專門的斷層重建軟件(如 Avizo、Amira 或 ImageJ 的 3D 插件)生成三維模型。
三維重建和分析:
重建后的三維模型可以用于觀察樣品內(nèi)部結(jié)構(gòu)、分析體積、測(cè)量尺寸或評(píng)估缺陷。
優(yōu)點(diǎn):
高分辨率:能夠在納米級(jí)分辨率下進(jìn)行三維重建。
局部化:可以對(duì)樣品的特定區(qū)域進(jìn)行精細(xì)分析。
缺點(diǎn):
破壞性:FIB 處理會(huì)損壞樣品。
時(shí)間長(zhǎng):需要重復(fù)采集和處理圖像,耗時(shí)較多。
2. 通過多視角 SEM 圖像重建
原理:
對(duì)樣品進(jìn)行不同角度的 SEM 成像(類似 CT 成像)。
利用計(jì)算機(jī)算法將這些多視角圖像重建為三維結(jié)構(gòu)。
具體步驟:
樣品旋轉(zhuǎn):
使用帶旋轉(zhuǎn)功能的樣品臺(tái),從不同角度獲取 SEM 圖像。
每次旋轉(zhuǎn)角度可精確到 1° 或更小,以確保成像的連續(xù)性。
圖像采集:
對(duì)樣品進(jìn)行多角度 SEM 掃描,獲取 2D 投影圖像序列。
保持成像條件一致(如電壓、工作距離、探測(cè)器設(shè)置)。
圖像重建:
將采集到的多角度圖像輸入斷層重建軟件。
通過算法(如反投影算法、ART 或 FBP)計(jì)算樣品的三維結(jié)構(gòu)。
優(yōu)點(diǎn):
非破壞性:樣品在成像過程中不會(huì)被損壞。
更適合輕質(zhì)材料或?qū)p傷敏感的樣品。
缺點(diǎn):
分辨率低于 FIB-SEM。
樣品幾何形狀復(fù)雜時(shí),可能會(huì)導(dǎo)致圖像失真。
3. 基于冷凍斷層的 SEM 成像
原理:
冷凍樣品后,利用 SEM 和 FIB 結(jié)合的方式逐層切割和成像。
冷凍保護(hù)樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu),尤其是生物樣品。
適用場(chǎng)景:
生物學(xué)領(lǐng)域(如細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)的三維重建)。
水合樣品或易受離子束損傷的材料。
斷層成像應(yīng)用領(lǐng)域:
材料科學(xué):
分析材料的內(nèi)部結(jié)構(gòu)、孔隙率和分布特性。
檢測(cè)材料缺陷或裂紋。
生物學(xué):
重建細(xì)胞或組織的三維結(jié)構(gòu)。
研究亞細(xì)胞器的形態(tài)和分布。
半導(dǎo)體行業(yè):
分析晶體管、納米級(jí)電路的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。
檢測(cè)制造過程中的缺陷或異物。
地質(zhì)學(xué):
分析巖石或礦物的微觀結(jié)構(gòu)。
測(cè)量孔隙度和滲透性。
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作者:澤攸科技